细胞污染，该如何应对？

对于养细胞的科研工作者，可谓是谈“污”色变，在细胞培养过程中，不论是成手还是新手，都无法避免的遭受过细胞污染的“祸害” ，不管是细菌、真菌、黑胶虫还是支原体，一旦招惹上这几个家伙，各个都是来者不善，甚至让您的细胞面临“绝种”的风险。针对细胞培养当中面临的最普遍的问题，作为科研工作者的我们必须清楚认识这些微生物，并通过技术手段判断细胞遭受了哪种污染，准确的对症下药，才能为我们的细胞保驾护航。
1 细菌污染
1.1 细菌污染的鉴别
细菌污染是细胞培养当中最常出现的污染类型，枪头不小心碰到瓶壁、手不小心从培养瓶口处穿过、培养基倒入培养瓶，不经意的一个小动作，都可能会造成细菌污染，以致于实验前功尽弃。
细菌污染在没有爆发或培养体系中含有双抗时，细菌污染较容易被科研工作者忽视，黑点在显微镜下一穿而过，小黑点因为数量少且移动迅速而不易发现。随着细菌在培养体系中的增多或者体系中撤掉双抗以后，细菌可以从镜下明显识别，会呈现黑色条状、棒状、球状，培养基的外观也会发生明显的变化，培养变浑浊，有细沙状沉淀，有时会伴有臭味。

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细菌污染

1.2 细菌污染的解决方式

一般的细胞培养体系中，普遍采用双抗或者三抗进行细菌的预防，但这两者存在一定的局限性，比如只能预防，而不能拯救已经细菌污染的细胞。另外，很多科研工作者从事原代的细胞分离和培养工作，在从动物身上取材并分离培养的过程中，极易造成细菌污染，如果只是加入双抗或三抗进行冲洗组织，细菌污染无法避免，造成了珍贵动物组织的浪费。
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Deeming细胞污染高效清除剂，不仅兼具双抗或三抗预防细菌的功效，还可以清除支原体污染，有效消除真菌和细菌的污染，只需1-3天就可显著抑制支原体、真菌、细菌的增殖，本产品经过了上百种细胞的测试和长期的实验验证，完美兼具高效和广谱清除细胞污染物的能力，对细胞生长几乎无影响，最大程度上挽救您的细胞。
2 真菌污染
2.1 真菌污染的鉴别
实验室污染的真菌一般为三类：念珠菌、酵母菌、霉菌，细胞污染真菌通常不易察觉，只有霉菌会逐渐出现细丝团状漂浮物，较容易从外观发觉污染，其他真菌污染不像细菌污染培养基会浑浊，污染后培养液清澈透亮，与未污染的细胞从外观上看无明显变化。在显微镜下比较容易判断污染类型，念珠菌呈卵圆状，在细胞周边生长，酵母菌出芽生殖时有明显的一大一小连体结构，霉菌可观察到菌丝体，菌丝呈丝状、管状、树枝状。

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真菌污染

2.2 真菌污染的解决方式

真菌污染由于不容易通过培养基的变化来判断，一般发现时就是已经爆发了，镜下会出现明显团状或黑色丝状污染物，细胞状态明显变差，很难救活。传统的预防真菌污染的方式为培养体系中加入三抗，但是一旦发生真菌污染，三抗对于明显的真菌污染就显得心有余而力不足，此时建议如果是还留存种子的细胞就立刻扔掉，彻底消毒灭菌细胞房和CO2培养箱，扔掉可能被污染的培养基，对用过的实验器材进行灭菌。
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3 黑胶虫污染
3.1 黑胶虫污染的鉴别
“黑胶虫”是一种常见的细胞污染物，与细胞共生，随细胞传代而传代。 “黑胶虫”与细胞竞争性生长，对细胞生长不利，严重时导致细胞死亡。目前很多细胞存在被“黑胶虫”污染的现象，对细胞培养及其后续实验造成了极大地影响。 “黑胶虫”污染的细胞常见的特性有以下几点：（1）培养基不浑浊，但在显微镜下观察细胞时，细胞周围和培养液中有很多“小黑点” ，且随着培养时间的延长“小黑点”逐渐增多，更换培养液或洗涤细胞不能将其去除；（2）“黑胶虫”污染的细胞，营养消耗快，需要频繁更换培养液；（3）“黑胶虫”污染的细胞生长缓慢，细胞状态差，空泡化严重，甚至还可能导致细胞形态的改变。