【基因|肌球蛋白重链10基因沉默减少U251、T98G和SHG44中细胞迁移和侵袭】
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AbMole精研抑制剂十年 ， 最新的科研动态不断与您分享 。 本期与您分享的是：肌球蛋白重链 10 (MYH10) 基因沉默通过抑制 Wnt/b-Catenin 通路减少U251、T98G 和 SHG44 中的细胞迁移和侵袭 。
肌球蛋白重链 10 或 MYH10 基因编码非肌肉肌球蛋白 II B (NM IIB) ， 并参与肿瘤细胞迁移、侵袭、细胞外基质 (ECM) 产生和上皮间质转化 (EMT) 。 本研究旨在通过基因沉默研究 MYH10 基因对体外正常人神经胶质细胞和神经胶质瘤细胞系的影响 ， 并确定所涉及的信号通路 。 本研究研究了正常人神经胶质细胞系 HEB 和神经胶质瘤细胞系 U251、T98G 和 SHG44 。 质粒转染使 MYH10 基因沉默 。 细胞计数试剂盒-8 (CCK-8) 测定评估细胞活力 。 使用划痕和 transwell 测定评估细胞迁移和侵袭 。Western blot检测蛋白表达水平 ， 实时定量聚合酶链反应（qRT-PCR）检测mRNA表达水平 ， 对于MYH10、转移相关蛋白1（MTA-1）、基质金属蛋白酶（MMP） )-1、MMP-9、金属蛋白酶 2 (TIMP2)、胶原蛋白 1、E-钙粘蛋白、波形蛋白、Wnt3a、b-连环蛋白和细胞周期蛋白 D1 的组织抑制剂 。
研究结果表明 ， MYH10 基因在 U251、T98G 和 SHG44 细胞中过表达 。 在 siMYH10 质粒干扰后 ， MYH10 表达下调 ， 这也抑制了胶质瘤细胞的迁移和侵袭 。MYH10 基因沉默导致 MTA-1、MPP-2、MMP-9 和波形蛋白的表达降低 ， TIMP-2、E-钙粘蛋白和胶原蛋白 1 在蛋白质和 mRNA 水平的表达增加 ， 并抑制 Wnt/b-连环蛋白途径 。 总之 ， 在人神经胶质瘤细胞系中 ， 沉默 MYH10 基因通过抑制 Wnt/b-catenin 通路来减少细胞迁移和侵袭 ， 这可能调节人神经胶质瘤中的 ECM 并抑制 EMT 。
Phosphatase inhibitors（Abmole ， M7528）被用于防止研究中蛋白和脂类的磷酸化状态丢失 ， 为蛋白磷酸化提供更加全面的保护 ， 以更好地进行Western blot等实验 。
Figure 1. Expression of the MYH10 mRNA and protein in U251 T98G and SHG44 glioma cell lines.
结果表明 ， MYH10基因在HEB和胶质瘤细胞中均有表达 ， 但MYH10基因在U251、T98G和SHG44胶质瘤细胞系中的相对表达水平显著高于HEB细胞系（P<0.05） 。与U251和SHG44胶质瘤细胞系相比 ， T98G胶质瘤细胞中MYH10基因的相对表达水平显着升高（P<0.05） 。
Figure 2. Effects of siMYH10 plasmid interference on the expression levels of MYH10 cell viability cell motility and cell invasion of the T98G human glioma cell line.
结果显示转染后MYH10 mRNA和蛋白表达水平显着降低（P<0.01） 。 这些发现证实质粒构建和转染是成功的 。
鸣谢：Yang Wang et al. Med Sci Monit. 2018 Dec 15;24:9110-9119.
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