握住“上帝的手术刀”( 六 )_【老冀曰】CRISPR基因编辑是目前最红火

我在这个实验中添加了大约1.5μL 的 T7 RNA 聚合酶，这也是这次实验中最贵的材料——每滴的售价大概要上百元。在向 DNA 模板中添加了纯水、缓冲溶液、RNA 合成酶和 RNA 分解抑制剂之后，我们就将得到20μL的反应物，放到聚合链式反应仪中在接近人体体温的37℃下进行大约1.5小时的增生。添加进去的就是无色透明液体，而出来的还是无色透明液体。不过根据我们所学习的理论知识，我们知道里面已经发生了很多反应。如果我们的操作没有出现错误的话，就应该生成了很多我们所需要的引导 RNA。

在配制了CRISPR 基因编辑工具的引导模块以后，我们就可以将它和 Cas9蛋白混合在一起，得到一把人类梦寐以求的“上帝的手术刀”。

接下来就需要将溶液转染到斑马鱼的胚胎中了。我们使用的是一种物理转染的方法——显微注射。注射是一个精细的过程，需要用到体式显微镜、显微操作仪和数字显微注射泵。显微操作仪使用转轮进行微米级的操控，而注射泵则可以控制一帕斯卡级别的气压，从而实现定量的精准注射。显微注射已经成为了华大基因实验员的基本功，每位实验员都要一个月的集中练习才能最终实现高于95%的成功率。