Worthington解离酶:中性蛋白酶(分散酶)详情解析


Worthington解离酶:中性蛋白酶(分散酶)详情解析


艾美捷Worthington中性蛋白酶(分散酶):
【Worthington解离酶:中性蛋白酶(分散酶)详情解析】中性蛋白酶(分散酶)是由多粘芽孢杆菌产生的一种细菌酶  , 可水解非J性氨基酸残基的 N 端肽键 , 被归类为氨基内肽酶 。 其温和的蛋白水解作用使该酶特别适用于分离初级和次级(继代培养)细胞 , 因为它可以保持细胞膜的完整性 。
在许多原代细胞分离和组织解离应用中 , 中性蛋白酶(分散酶)也经常与胶原酶和/或其他蛋白酶一起用作辅助酶 。 中性蛋白酶(Dispase)比上皮样细胞更有效地解离成纤维细胞样细胞 , 因此它也被用于差异分离和培养应用 。 其他优点是它的非哺乳动物(细菌)来源和被EDTA抑制的能力 。

组织分离/原代细胞分离和细胞收获是酶在组织中的主要应用培养、干细胞研究和细胞生物学研究 。 细胞分离程序的目标是最大化功能上可行的分离细胞的产量 。 有许多参数可能会影响结果 。 酶的选择是一个重要参数 。 Worthington组织分离指南总结了这些酶如何完成组织分离和原代培养的“常规”操作细胞采集 。
艾美捷Worthington中性蛋白酶(分散酶)特异性:
中性蛋白酶是一种非特异性金属蛋白酶 。 它切割纤连蛋白、胶原蛋白 IV和较小程度的胶原蛋白I , 但它不切割胶原蛋白V或层粘连蛋白 。 它水解非J性氨基酸残基的N端肽键 , 并可能优先攻击具有暴露疏水性氨基酸残基的变性和细胞间蛋白质 。 据信每个亚基结合一个锌离子和四个钙离子 。 与其他产生中性、碱性或两种蛋白酶混合物的芽孢杆菌不同 , 多粘类芽孢杆菌是仅产生中性蛋白酶的三个种类之一(Fogarty和Griffin 1973) 。
艾美捷Worthington中性蛋白酶(分散酶)应用:
组织分解和继代培养
防止不需要的细胞聚集
培养细胞的制备
将完整的表皮从真皮中分离出来 , 并从培养基中分离出完整的上皮层 (Kurt et al. 1989)
正常、二倍体细胞和细胞系的收获和转移 (Matsumura et. al 1975)
温和且完整的表皮细胞脱离(Kitano和Okada 1983)
Worthington核心酶:包括:胶原蛋白酶 , 脱氧核糖核酸酶I , 弹性蛋白酶 , 木瓜蛋白酶 , 核糖核酸酶 , 胰蛋白酶等 。

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