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【AbMole科研-Celastrol通过靶向过氧化物酶和HO-1诱导活化的造血干细胞铁死亡】AbMole精研抑制剂十年 ， 最新的科研动态不断与您分享 。 本期与您分享的是:Celastrol通过靶向过氧化物酶和HO-1 ， 诱导活化的造血干细胞铁死亡 ， 从而改善肝纤维化 。
铁死亡是一种调节细胞死亡的形式 ， 其特征是以铁和活性氧(ROS)依赖的方式进行过度的膜脂过氧化 。 Celastrol是从雷公藤中提取的天然生物活性三萜 ， 对多种肝脏疾病具有抗纤维化和抗炎活性 。 然而 ， Celastrol在肝纤维化治疗中的确切作用分子机制和直接蛋白靶点仍不清楚 。 在本研究中 ， 我们发现Celastrol通过促进ROS的产生和诱导激活的肝星状细胞(HSCs)的铁死亡来发挥抗纤维化作用 。 通过活性蛋白谱分析(ABPP)结合生物正交点击化学反应和细胞热位移分析(CETSA) ， 我们发现Celastrol可直接通过半胱氨酸活性位点与PRDX1、PRDX2、PRDX4和PRDX6等过氧化物多蛋白(PRDXs)结合 ， 抑制其抗氧化活性 。 Celastrol还靶向血红素加氧酶1 (HO-1) ， 并上调其在活化的造血干细胞中的表达 。 在造血干细胞中下调PRDX1 PRDX2 PRDX4 PRDX6或HO-1 ， 可不同程度地提高细胞ROS水平 ， 诱导铁死亡 。 综上 ， 该研究结果揭示了Celastrol改善肝纤维化的直接蛋白靶点和分子机制 ， 从而支持了Celastrol作为一种有前途的肝纤维化治疗药物的进一步发展 。
Acetylcysteine(N-acetyl-l-cysteine) (Abmole ， M5385 ， 纯度100%)是ROS抑制剂 ， 拮抗多种蛋白酶体抑制剂的活性 。 它还是肿瘤坏死因子TNF的抑制剂 。 Deferoxamine甲磺酸盐（Abmole ， M5558 ， 纯度>99%）是一种铁螯合剂 ， 也是一种铁死亡的抑制剂 ， 可在体外低氧和高血糖状态下稳定HIF-1α的表达并改善HIF-1α的活性 。
Figure 2．Celastrol exertsanti-fibrosis effect by inducing ferroptosis in activated-HSCs.
为了证实铁死亡是否参与了Celastrol的抗纤维化活性 ， 确定抑制铁死亡是否消除了Celastrol的抗纤维化作用 。 使用了两种亚铁死亡抑制剂Deferoxamine(DFO ， 一种铁螯合剂)和N-acetyl-l-cysteine(NAC ， 一种半胱氨酸前药 ， 作为亲脂性抗氧化剂) 。 LX-2细胞与Celastrol一起孵育 ， 并与DFO和/或NAC共同处理24 h 。 正如预期的那样 ， LX2细胞经Celastrol处理后显示出更多的LPO和更高水平的Fe2t/Fe3t ， 表明铁死亡的发展 ， 而DFO和/或NAC共同处理可减轻细胞活力的损失 ， 降低LPO、Fe2t/Fe3t和ROS水平 ， 并增加GSH水平 。 此外 ， Western blotting结果显示 ， DFO和/或NAC共同处理显著减弱了Celastrol对α-SMA和COL1A1水平的降低 。 这些结果表明Celastrol通过调节铁死亡和ROS信号通路改善肝纤维化 。
鸣谢：PiaoLuo et al. Acta Pharmaceutica Sinica B 2022;12(5):2300e2314.
