国产新技术终于来啦!基因魔剪成了分子诊断的新帮手( 六 )
然而,课题组将CRISPR体系作为核酸等温扩增反应的开关,并应用于分子诊断领域的研究尚属首次。同时,CRISDA技术背后原理十分复杂,为了实现这一基因快检技术,团队在研发过程中也经历了多重考验。“可以说我们当时是在一个完全未知的领域探索,每个技术细节都是靠我们不断的尝试和优化来实现的。” 周文华提到。
CRISDA:四大优势
目前,研究团队已通过两步反应,在90分钟内,对极微量(20 μL)复杂溶液样品中的个位拷贝数的靶核酸分子成功实现了等温扩增检测,如人基因组片段、乳腺癌致病风险相关的突变位点或转基因大豆基因组等。CRISDA技术在这一极微量体积和极低浓度下的优异性能,可完全满足目前分子诊断中,针对循环肿瘤DNA(ctDNA)和循环游离胎儿DNA(cffDNA)等检测的需求。
图6/8
利用CRISDA技术对aM量级的靶分子进行单核苷酸多态性(SNP)扩增检测。(a)不同细胞株基因组中rs3803662位点的测序验证;(b)利用CRISDA技术对该SNP位点进行高灵敏度扩增检测。(图片来源:论文)
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