国产新技术终于来啦!基因魔剪成了分子诊断的新帮手( 七 )

CRISDA技术在诸多方面均优于传统PCR技术,

首先,在灵敏度方面,由于CRISDA技术与传统PCR技术相比具有更优异的抗干扰性,其可在复杂背景条件下,对aM(10-18M)浓度的靶核酸分子进行高效扩增检测。而在相同条件下,PCR技术由于抗干扰能力较差,无法实现有效扩增。

其次,在特异性方面,CRISDA技术无需优化即可实现对极低浓度的靶核酸分子进行单核苷酸多态性(SNP)检测。而PCR技术要实现SNP检测则需通过联合测序、酶反应或者多重引物等条件来实现,其成本和复杂程度无法满足快速分子诊断的需求。

第三,在普适性方面,在CRISDA检测反应中,所需的扩增引物设计简单,无需优化即可迅速实现对新位点的检测反应体系开发。而PCR反应或其他等温扩增反应则需经过大量优化。目前,课题组已利用该技术成功检测出人基因组中乳腺癌相关的单核苷酸位点突变,并在野生型大豆中成功检测出万分之三的转基因大豆。

第四,在操作难度方面,CRISDA技术无需依赖仪器,仅通过简单操作,即可在90分钟内即可完成从富集到扩增检测的全部过程。且整个过程对温度依赖极低。而传统的PCR技术则需依赖多步繁琐操作,过程耗时4小时,且对仪器控温要求极高。

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