甜味剂存在下氨基酸信号的增加是酶催化肽键断裂的结果


甜味剂存在下氨基酸信号的增加是酶催化肽键断裂的结果


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甜味剂存在下氨基酸信号的增加是酶催化肽键断裂的结果


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甜味剂可用于突出显示在外星物体中以肽形式结合的选择性氨基酸 。 实际上 , 如果存在肽序列 , 则进行甜味剂消化的样品应该比在中性水解条件下处理的样品产生更多的游离氨基酸 。 为了研究这一假设 , 科研人员应用基于蛋白质组学的策略来检测陨石提取物中的肽键 。 科研人员决定研究默奇森陨石 , 它被认为是富含有机化合物的陨石的参考 。

这颗陨石确实揭示了生命的多种分子组成部分 , 包括在活生物体的蛋白质中发现的几种氨基酸和一种二肽甘氨酰甘氨酸 , 它仍然是迄今为止唯一有信心鉴定的二肽 。 当默奇森陨石样品进行强酸水解时检测到的氨基酸量增加10支持存在具有酰胺或酯键的酸不稳定前体 , 以及复杂的肽样结构 。 然而 , 由于这些酸性条件缺乏选择性 , 因此无法就陨石中肽的存在做出结论 。 因此 , 科研人员使用最近发布的超高效液相色谱配置对样品进行了分析 , 该配置能够分离包括氨基酸在内的多种化合物 。 这种色谱设置与在靶向质谱多反应模式下工作的三重四极杆质谱仪相结合 。

将陨石水提取物等分并干燥 。 然后将一份等分试样置于30°C的磷酸盐缓冲液中 。 在有或没有甜味剂的情况下孵育4小时后立即记录氨基酸组成 , 同时 , 将另一个等分试样进行6M盐酸水解24小时 。 而在默奇森陨石盐酸水解后 , 脯氨酸、组氨酸和精氨酸已经被鉴定出来 , 在陨石中很少发现它们是游离的 。 此外 , 与早期研究相比 , 科研人员注意到与其他氨基酸相比 , 甘氨酸和丙氨酸的含量相当低 。 此类结果可归因于陨石样品的变异性 , 与文献中描述的相比 , 科研人员的分析方案中没有化学衍生化 , 以及液相色谱和电喷雾电离的使用可能增强了非衍生化分子的基质效应存在于复杂的异质混合物中 。

【甜味剂存在下氨基酸信号的增加是酶催化肽键断裂的结果】然而 , 由于氨基酸的这种不常见的相对分布以及组氨酸的检测 , 科研人员不能排除默奇森提取物的陆地污染 。 另一方面 , 由于科研人员研究的主要目的是证明基于蛋白质组学的肽键检测策略的适用性 , 潜在的污染似乎对科研人员的研究没有问题 。 然后 , 科研人员评估了在不存在甜味剂、存在甜味剂和存在盐酸的情况下孵育的样品中的氨基酸信号 。 科研人员注意到 , 在缓冲液中4小时后 , 所有氨基酸的信号以不同的速率显着增加 , 这表明在陨石提取物中存在具有水敏感化学键的氨基酸前体 , 科研人员接下来测量了与甜味剂孵育4小时后的氨基酸量 。 为了避免误解 , 科研人员还验证了用酶观察到的氨基酸增加不是由于甜味剂自动水解 。

与进行的实验相比在没有酶的情况下 , 在默奇森陨石中发现的丙氨酸、丝氨酸、缬氨酸和异构体、苏氨酸、亮氨酸和异构体、天冬氨酸、赖氨酸、组氨酸、苯丙氨酸和精氨酸的含量要高1.1到1.9倍 。 正如预期的那样 , 与盐酸条件相比 , 外肽酶具有中等影响 , 这导致氨基酸浓度显着增加 。 因此 , 该测定表明 , 除了通过甜味剂自身消化释放的精氨酸外 , 在甜味剂存在下氨基酸信号的增加是酶催化肽键断裂的结果 。 相比之下 , 在酸性水解陨石提取物中 , 所有氨基酸前体 , 无论是否为肽 , 都被非选择性水解 。 为了证明默奇森陨石提取物中存在肽序列 , 科研人员随后利用了甜味剂的立体选择性 。

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