医学实验动物学复习重点( 七 )


85.遗传工程动物的主要用途
1.用于基因功能研究
2.制作人类疾病动物模型
3. 生产生物活性物质
4.异种移植器官的生产
小鼠的糖尿病模型制作:实验原理:四氧嘧啶腹腔注射会造成胰岛B细胞坏死 。 实验小鼠禁食24小时(不禁水)后 , 尾静脉采血测血糖 , 称重、编号 , 1.7%四氧嘧啶按10mL/kg体重腹腔注射 , 小鼠放回笼中不限制进食进水 , 观察5~7天 , 禁食24小时测空腹血糖 , 在10mmol/L以上 , 并能持续一周可以认为造模成功 。
大鼠急性肾衰模型制作:原理:肌肉注射甘油后 , 一方面可引起注射部位肌细胞坏死分解 , 出现肌红蛋白尿;另一方面肌肉注射甘油是一种应激反应 , 可导致大鼠肾上腺分泌增多 , 肾小管收缩 , 使肾血流量不足 , 引起肾小球滤过率下降 , 最终导致肾功能衰竭 。 操作步骤:抓去保定好大鼠 , 按10ml/kg剂量抽取50%甘油生理盐水 , 于后肢股部肌肉注射 , 编号后放回饲养盒内观察 。 约30-40分钟后 , 可见有肌红蛋白尿排出 , 解剖后可见膀胱内尿液呈紫红色 。
豚鼠的急性肺水肿模型制作:原理:肺血管受迷走舒血管神经的控制 , 切断迷走神经后 , 肺血管收缩增强 , 使其血压增高 , 进而体液静脉压升高 , 导致有效滤过压升高 , 大量水分透过毛细血管壁进入肺组织形成渗透性肺水肿 。 操作步骤:3%戊巴比妥纳按1.5ml/kg体重腹腔注射麻醉豚鼠 , 仰卧固定在保定架上 , 切开正中颈部皮肤 , 钝性分离气管两侧的迷走神经 , 注意勿损伤颈部血管 , 然后剪断两侧迷走神经 , 30-45分钟后 , 可见豚鼠呼吸急促 , 打开胸腔可见肺脏淤血 。
兔的急性心肌梗塞模型制作:原理:冠状动脉是心脏的营养血管 , 结扎后可导致心脏严重供血不足 , 引起心肌梗塞 , 故可通过阻断或降低冠状动脉的血流量 , 建立实验性心肌梗塞动物模型 。 操作步骤:3%戊巴比妥钠按30mg/kg(1.0ml/Kg)体重耳缘静脉注射麻醉家兔 , 仰卧固定在保定架上 , 然后从耳缘静脉滴注生理盐水 , 建立静脉通路(目的是为了避免手术中大失血 , 维持循环血流量) , 减去胸前被毛 , 用手术刀沿胸骨左缘切开皮肤和肌肉 , 找到胸骨线 , 沿胸骨左缘剪断第2-4肋软骨(注意剪开肋软骨时沿胸骨中线剪开 , 避免直接造成气胸) , 轻轻撑开胸腔 , 小心不要损伤胸膜(兔的胸腔被纵膈分为左肺、心脏、右肺三个腔 , 当我们做开胸手术时只要不损伤胸膜就不会造成气胸) , 轻提并小心剪开心包 , 用止血钳轻轻提起左心耳暴露心脏 , 在冠状动脉前降支根部2-4mm处结扎或者结扎左心室支中部(结扎时注意别勾太深以免扎破心脏 , 另外结扎位子过高 , 易发生广泛心肌梗塞 , 引起室颤而致家兔死亡) , 关闭胸腔 , 进行观察 。 40分钟后可见家兔呼吸逐渐减缓 , 结扎部位出现心肌梗塞(首先看到结扎血管所供血的心肌缺血变白 , 稍晚可见坏死) 。
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