分子生物学知识点归纳( 九 )


2.平端连接 。
3.同聚物加尾连接 。
4.人工街头连接 。
(4)重组DNA导入受体细胞 。
1.转化:是指将质粒或其他外源DNA导入处于感受态的宿主菌 , 并使其获得新的表型的过程 。
2.感染:λ噬菌体、粘性质粒和真核细胞病毒为载体的重组DNA分子 , 在体外包装成具有感染能力的病毒或噬菌体颗粒 , 然后才能感染适当的细胞 , 并在细胞内扩增 。
3.转染:转染是转化和感染两个词构成的新词 , 指真核细胞主动摄取或被动导入外源DNA片段而获得新的遗传表型的过程 。 常用方法有:电穿孔法、磷酸钙共沉淀法和脂质体融入法等 。
(5)重组体的筛选 。
1.遗传学方法
2.免疫学方法
3.核酸杂交法
4.PCR技术
5.酶切鉴定
(6)克隆基因的表达
137.真核细胞转染的方法:
(1)磷酸钙共沉淀法
(2) 电穿孔法
(3)DEAE-葡聚糖法
(4)脂质体介导基因转染
(5)显微注射法
138.重组DNA技术应用
(1)疾病基因的发现和克隆
(2)生物制药
(3)基因诊断
(4)基因治疗
(5)遗传病的预防
139.细胞间信息物质(第一信使):凡由细胞分泌的调节靶细胞生命活动的化学物质统称细胞间信息物质 。 包括:神经递质、内分泌激素、局部化学介质和气体信号 。
140.细胞内信息物质:在细胞内传递细胞调控信号的化学物质称为细胞内化学物质 。
141.第二信使:通常将Ca2+、cAMP、cGMP、DAG、IP3、Cer、花生四烯酸及其代谢产物这类在细胞内传递信息的小分子化合物称为第二信使 。
142.第三信使:负责细胞核内外信息传递的物质称为第三信使 。 是一类可与靶基因特异序列结合的核蛋白 , 能调节基因的转录 , 因此又称为DNA结合蛋白 。
143.膜受体分为:环状受体、G蛋白偶联受体、单次跨膜α螺旋受体和具有鸟苷酸环化酶活性的受体 。
144.胞内受体包括四个区域:高度可变区、DNA结合区、铰链区和激素结合区 。
145.受体与配体结合的特点:高度专一性、高度亲和力、可饱和性、可逆性和特定的作用模式 。
146.膜受体介导的信息转导途径
(1)cAMP-蛋白激酶途径 。
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