微生物检验方法-生理指标法|初农生物


微生物检验方法-生理指标法|初农生物


微生物的生长伴随着一系列生理指标发生变化 , 例如酸碱度 , 发酵液中的含氮量 , 含糖量 , 产气量等 , 与生长量相平行的生理指标很多 , 它们可作为生长测定的相对值 。
【微生物检验方法-生理指标法|初农生物】
1、测定含氮量:大多数细菌的含氮量为干重的12.5% , 酵母为7.5% , 霉菌为6.0% 。 根据含氮量×6.25 , 即可测定粗蛋白的含量 。 含氮量的测定方法有很多 , 如用硫酸 , 过氯酸 , 碘酸 , 磷酸等消化法和Dumas测氮气法 。
2、测定含碳量:将少量(干重0.2-2.0 mg)生物材料混入1毫升水或无机缓冲液中 , 用2毫升2%的K2Cr2O7溶液在100℃下加热30分钟后冷却 。 加水稀释至5毫升 , 在580nm的波长下读取吸光光度值 , 即可推算出生长量 。 需用试剂做空白对照 , 用标准样品做标准曲线 。
3、还原糖测定法:还原糖通常是指单糖或寡糖 , 可以被微生物直接利用 , 通过还原糖的测定可间接反映微生物的生长状况 , 常用于大规模工业发酵生产上微生物生长的常规监测 。
4、氨基氮的测定:方法是 , 离心发酵液 , 取上清液 , 加入甲基红和盐酸作指示剂 , 加入0.02N的NaOH调色至颜色刚刚褪去 , 加入底物18%的中性甲醛 , 反应数刻 , 加入0.02N的使之变色 , 根据NaOH的用量折算出氨基氮的含量 。 根据培养液中氨基氮的含量 , 可间接反映微生物的生长状况 。
5、其他生理物质的测定:
P , DNA , RNA , ATP , NAM(乙酰胞壁酸)等含量以及产酸 , 产气 , 产CO2(用标记葡萄糖做基质) , 耗氧 , 黏度 , 产热等指标 ,都可用于生长量的测定 。 也可以根据反应前后的基质浓度变化 , 终产气量 , 微生物活性三方面的测定反映微生物的生长 。

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