（4）将孵育过GST-A的柱子吸取介质40μL ， 加入loading buffer煮10 min后作为Input， 4℃备用 ， 用于检测GST-A是否已经挂在柱子上；
（5）向柱子中加入2mL的HIS-B ， 4℃孵育过夜 ， 并且取40 μL蛋白作为HIS-B加入loading buffer煮10 min后作为质控 ， 4℃备用；
（6）流出孵育液后（收F2） ， 用预冷的1×PBS 200 mL洗涤大约15次；（流出的PBS要收集 ， 洗涤液收集3管 ， 刚开始 ， 中间 ， 最后标为W4W5W6）
（7）取40ul介质(IP1) ， 加SDS loading煮10min后4℃备用 ， 用于检测HIS-B蛋白是否和GST-A蛋白互作 。
- 实验结果
纯化后蛋白考马斯亮蓝染色照片
Pull down实验过程结果照片
【蛋白互作的多种检测方法介绍——NanoBiT、Pull Down和CoIP实验】Pull down结果
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