巢式pcr 巢式pcr如何做
【巢式pcr 巢式pcr如何做】
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大家好,小甜来为大家解答以下的问题，关于巢式pcr如何做 ， 巢式pcr这个很多人还不知道,现在让我们一起来看看吧！
1、其优点是：克服了单次扩增平台期效应的限制 ， 使扩增倍数提高，从而极大的提高了PCR的敏感性；2、由于模板和引物的改变，降低了非特异性反应连续放大进行的可能性，保证了反应的特异性；3、内侧引物扩增的模板是外侧引物扩增的产物，第二阶段反应能否进行，也是对第一阶段反应正确性的鉴定，因引可以保证整个反应的准确性及可行性 。
2、但其亦有缺点：进行第二次PCR坟增引起交叉污染的几率大 。
3、为了克服此缺点，可彩用同一反应管中巢式PCR ， 主要利用内外引物Tm值不同 。
4、如果你已排除引物，酶，RNA提?。?逆转录等等其他原因引起的PCR不成功 ， 确定关键原因是模板量低的话，可以用巢式 。
本文分享完毕 ， 希望对大家有所帮助 。
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