Nat Cardiovasc Res:只想标记/操控CNS内皮细胞?AAV-BI30高效助力( 二 )
图5 | AAV-BI30视网膜内皮细胞标记效果显著优于AAV-BR1AAV-BI30可用于脑内皮细胞特异性基因调控
为了评估AAV-BI30在体内对中枢神经系统内皮细胞的基因调控能力 , 作者将AAV-BI30:CAG-Cre-miR122-WPRE注入Rosa26:CAG-LSL-tdTomata(Ai9)小鼠 , 表达12d后 , 在整个脑微血管系统以及位于软脑膜表面的动脉和静脉中均观察到tdTomato的强表达 。
图6 | 内皮细胞特异性基因调控作者还用小窝蛋白(Caveolin-1)敲除的实验 , 验证了AAV-BI30介导的Cre递送的高度特异性 。 结果显示 , 小窝蛋白的缺失只出现在内皮细胞中 , 小动脉平滑肌细胞层中小窝蛋白表达则无明显改变 。 这些都说明 , AAV-BI30介导的Cre递送具有高度特异性 。
鉴于目前还没有中枢系统内皮细胞特异性的基因调控方案存在 , AAV-BI30介导的Cre递送系统可能成为常用的CDH5:CreERT2或TIE2:Cre等系统的良好替代 。
图7 | AAV-BI30介导的Cre传递实现了高效的内皮特异性基因缺失总 结
AAV-BI30是一种极具潜力的新型血清型 , 它在CNS中的嗜性几乎只限于内皮细胞 , 且无需借助特异性启动子 , 因此具有广泛的可操纵空间 , 非常适合各种类型的应用 。 例如CNS内皮细胞示踪、细胞形态观察、血管网络重塑、功能调控、基因编辑、实时成像或双组分调节表达系统等 。
这种血清型也非常适合加速我们对正常生理中神经血管相互作用的理解 , 解决神经血管疾病相关机理问题 , 并帮助开发治疗内皮功能障碍的治疗方法 。
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