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THP-1细胞培养秘籍
THP-1细胞系是1980年Tsuchiya等人建立的人单核细胞白血病细胞系 。 它来自一位急性单核细胞白血病患者的血液 ， 有分化为多种巨噬细胞的能力 ， 是各领域研究常用的细胞系之一 。
THP-1是人外周血的单核细胞系 ， 最初来源于急性单核细胞性白血病患者 。 属于悬浮细胞 ， 适合用于转染或感染实验 。 其表面抗原HLA型为：A2 ， A9 ， B5 ， DRw1 ， DRw2 。
操作指南
常见问题
许多科研小伙伴
在培养THP-1单核细胞时
可能会遇到细胞收货时出现伪足
培养过程中细胞发生贴壁
或聚团等情况
在这里小逸
为大家整理一份
THP-1细胞培养攻略及常见问题
希望能帮助到童鞋们
产品参数
01
THP-1细胞基本信息
THP-1人单核细胞白血病细胞
名称：人单核细胞白血病细胞THP-1
来源：人
特性：悬浮生长
形态：单核细胞
支原体：无
推荐传代比例：1:2-1:3
推荐换液频率：2~3次/周
冻存液：无血清冻存液 ， 液氮储存
规格：1x10^6cells/T25或1mL冻存管
倍增时间：~36-72 小时
培养基：90% 1640+10% FBS+PS+ 0.05 mM 2-巯基乙醇(2-mercaptoethanol)
保藏机构：ATCC
培养条件气相：95%空气+5%二氧化碳；温度：37℃
THP-1细胞培养基
THP-1人单核细胞
完全培养基
THP-1细胞STR鉴定
到货处理
02
THP-1细胞收货处理
复苏细胞T25瓶
复苏THP-1细胞
1.收到THP-1细胞后首先观察细胞瓶是否完好 ， 培养液是否有漏液、浑浊等现象 ， 若有上述现象发生及时和我们联系；
2.用75%酒精消毒瓶壁 ， 将T25瓶置于37℃培养箱放置4-6h ， 显微镜下观察细胞状态；
3.给收到的细胞拍照(10x20x)各2-3张以及培养瓶外观照片一张留存 ， 作为细胞需要售后时提供收到细胞时细胞状态的依据 。
冻存细胞冻存管
冻存THP-1细胞
1.收到THP-1单核细胞后 ， 若发现干冰已挥发干净 ， 冻存管瓶盖脱落、破损及细胞有污染 ， 请立即拍照并与我们联系；
2.为保证细胞的高存活率 ， 收到细胞后 ， 需立即转入液氮冻存或直接复苏 。
收货注意事项
1.收货时需镜下拍照（看密度、状态）
2.静置后需镜下拍照（看整体密度）
a.如密度50%以下 ， 建议换液并竖瓶培养
b.如密度50%-80% ， 建议换液培养 ， 隔天观察密度
c.如密度90% ， 建议传代
3.换液及传代处理前 ， 培养瓶竖着放置至少半小时（使细胞沉到瓶底）；收集上清 ， 必须将瓶内所有培养基（70ml）全部收集！并用PBS（10ml）润洗瓶底并收集！离心转速为1000rpm ， 5min 。
4.运输用的培养基（灌液培养基）不能再用来培养细胞 ， 请换用按照说明书细胞培养条件新配制的完全培养基来培养细胞 。
培养指南
03
THP-1细胞培养步骤
???
THP-1单核细胞特点
1.THP-1细胞为悬浮生长 ， 部分细胞聚集成团 ， 部分细胞分散 。
2.THP-1细胞喜欢酸性环境
在偏酸性环境中 ， THP-1生长更快 ， 所以当培养基稍微变黄（呈橘红色）时 ， 是适合细胞生长的 ， 此时补液或半换液即可 。
3.THP-1细胞有密度依赖性
THP-1细胞密度低时 ， 生长较慢 ， 培养密度维持在50万-100万细胞/毫升为宜；超过200万/毫升则需要传代 。
4.THP-1细胞对血清要求高
血清质量差异可能引起细胞状态变化 ， 建议选用高质量的胎牛血清 。 选择品质好的血清更有利于THP-1细胞生长 。
???
THP-1细胞复苏步骤
1.将含有1 mL THP-1单核细胞悬液的冻存管在 37℃水浴中迅速摇晃解冻 ， 在1000 rpm条件下离心3 min ， 弃去上清液加1 mL 10%FBS 1640培养基后吹匀
2.将所有细胞悬液加入6 cm皿中 ， 加入约4 mL培养基 ， 培养过夜 。
3.第二天换液并检查THP-1单核细胞密度 。
请客户用相同条件的培养基用于细胞培养
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