恶性肿瘤|【shRNA慢病毒文章分享】Bioactive Materials ‖湖南大学胡小晓团队揭示核…
【恶性肿瘤|【shRNA慢病毒文章分享】Bioactive Materials ‖湖南大学胡小晓团队揭示核…】
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近日 ， 湖南大学胡小晓副教授团队在综合性国际学术期刊《Bioactive Materials》上发表了“DNA aptamer S11e recognizes fibrosarcoma and acts as a tumor suppressor”的研究论文 ， 该团队筛选出了一条能特异性识别纤维肉瘤的核酸适体 ， 确定了其目标功能靶点Diablo/SMAC ， 并初步揭示了核酸适体S11e促进纤维肉瘤凋亡机制并抑制其迁移和侵袭 。
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维真生物慢病毒产品为本研究助力！ 基因信息：人源Diablo/SMAC基因（促凋亡作用）
病毒产品：Diablo/SMAC 3保1 shRNA慢病毒
细胞类型：人纤维肉瘤细胞HT1080
用法：病毒感染24h后puro筛选稳转株
MOI：MOI : 1 MOI : 4
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研究背景 纤维肉瘤是一种侵袭性强、复发率高、预后差的恶性肿瘤 ， 可以发生在任何年龄、人体纤维组织的每一个部位 。 目前 ， 手术切除是纤维肉瘤的主要治疗方法，但 由于缺乏特异性的生物标记物 ， 无法准确诊断纤维肉瘤可能导致不理想的切除手术结果 ， 并降低生存率 。 因此 ， 为了潜在地解决这一临床需求 ， 探究分子探针用于早期诊断和靶向治疗和纤维肉瘤准确的预测 至关 重要 。
研究思路 在本研究中 ， 作者发现核酸适体S11e能够识别纤维肉瘤细胞(HT1080) ， 并且S11e能在HT1080异种移植小鼠模型和纤维肉瘤患者的肿瘤组织中识别肿瘤 。 此外 ， 作者还证实了S11e不依赖于溶酶体途径而内化到HT1080细胞中 ， 并位于线粒体中 。 不仅如此 ， 还发现S11e促进了HT1080细胞的凋亡 ， 并抑制了HT1080细胞的迁移 。 最后 ， 作者利用质谱方法研究了S11e的生物功能细胞靶点 ， 发现Diablo/ SMAC蛋白是S11e的细胞结合蛋白 ， 通过与S11e相互作用抑制HT1080细胞的迁移和侵袭 。 综上所述 ， 这些结果表明S11e可能有助于纤维肉瘤的早期诊断、靶向治疗和预后 。
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部分研究成果分享 1. S11e在HT1080细胞中的细胞器共定位
首先 ， 作者利用流式细胞术检测HT1080与已有的具有已知序列的核酸适体的结合能力 ， 成功的鉴定到与HT1080有高亲和力的S11e 。 接着 ， 分析探讨了S11e在HT1080细胞中的细胞器共定位 ， 发现溶酶体追踪器和cy5标记的S11e的荧光信号没有重叠 ， 线粒体荧光探针Mito-tracker和cy5标记的S11e荧光信号在4℃完全重叠 ， 表明S11e可以定位于HT1080细胞的线粒体 。 此外 ， S11e可以在不被溶酶体内化的情况下成功逃逸到线粒体中 ， 使S11e成为一种极好的潜在载体 ， 可以保护自己免受溶酶体中各种消化酶的降解 。
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