Worthington血浆胺氧化酶 (PAO) 说明书
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【Worthington血浆胺氧化酶 (PAO) 说明书】血浆胺氧化酶 (PAO)催化反应：
RCH 2 NH 2 + O 2 + H 2 O→RCHO + NH 3 + H 2 O 2
牛血浆胺氧化酶的分子量为 170 kDa ， 精胺的最适pH值为6.2 ， 亚精胺的最适pH值为7.2 。 胺氧化酶分为两类：血浆胺氧化酶所属的含吡哆醛和铜的酶 ， 以及含FAD的氨基氧化酶 。 天然底物包括儿茶酚胺、色胺衍生物和其他生理活性胺 。 血浆胺氧化酶用于需要氮基转移的研究 。 该分子由两条相同的多肽链组成 。 每个分子有两个磷酸吡哆醛和两个Cu +原子 。 牛血浆胺氧化酶受铜螯合剂、许多羧基试剂如铜酮、羟胺和氰化物的抑制 。 苯甲酸和苯甲醇都是非竞争性抑制剂（KI = 30和34mM分别） 。 Worthington采用的测定胺氧化酶的测定法基本上是Tabor等人 ， JBC ， 208 ， 645 ， (1954)的测定法 ， 反应温度降至25°C 。
艾美捷Worthington血浆胺氧化酶 (PAO)化学性质：
稳定性/储存：-20°C可稳定保存12个月 。 储存在-20°C 。
单位定义：在 25°C、pH 7.2条件下 ， 1个国际单位每分钟氧化1μmole苄胺 。
技术说明： 1 IU等于4330 Tabor单位 。 (TU)
艾美捷Worthington血浆胺氧化酶 (PAO)测定方案：
方法: Kapeller-Adler (1971)彻底审查了胺氧化酶的测定 。 Worthington采用的方法本质上是Tabor等人的方法 。 (1954)反应温度降至25°C 。
反应速度由苄胺氧化引起的 250 nm处吸光度的增加来确定 。 在指定条件下 ， 在25°C和pH 7.2条件下 ， 一个单位会导致每分钟氧化1微摩尔苄胺 。 如此定义的一个国际单位相当于4330个泰伯尔单位（泰伯尔和泰伯尔 ， 1972年） 。
试剂：
67 mM磷酸钾缓冲液pH 7.2
1.0% v/v (0.10 M)苄胺（如果有颜色 ， 重新蒸馏）在67 mM磷酸钾缓冲液中 ， pH 7.2（底物）
酶：
在 67 mM磷酸钾缓冲液（pH 7.2）中溶解至浓度为10 mg/ml 。
程序：
将分光光度计调整到 250 nm和25°C 。 将2.8 ml缓冲液和0.1 ml底物溶液倒入每个比色杯吸管中 。
在分光光度计中孵育 3-4分钟以达到温度平衡并建立空白率（如果有） 。 加入0.1 ml酶溶液并记录A 250增加6-8分钟 。 从曲线的线性部分计算 ΔA 250 /分钟 。 可能会出现2-3分钟的延迟 ， 之后反应应与A 250为0.75呈线性关系 。
艾美捷Worthington血浆胺氧化酶 (PAO)相关参考文献：
1.Achee F. Chervenka C. Smith R. and Yasunobu K.: XII. The Association and Dissociation and Number of Subunits of Beef Plasma Amine OxidaseBiochemistry 7 4329 1968
2.Bachrach U.: Metabolism and Function of Spermine and Related PolyaminesAnnu Rev Microbiol 24 109 1970
3.Bachrach U.: Function of Naturally Occurring Polyamines Academic Press NY1973
4.Bachrach U. and Reches B.: Enzymic Assay for SpermidineAnal Biochem 17 38 1966
Worthington核心酶：包括：胶原蛋白酶 ， 脱氧核糖核酸酶I ， 弹性蛋白酶 ， 木瓜蛋白酶 ， 核糖核酸酶 ， 胰蛋白酶等 。
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