HEK293细胞体外表达抗伪过敏作用是否与MRGPRX2相关( 四 )_肥大细胞(MC)是介导过敏反应发生的关键

我们没有观察到细胞ISL治疗后， LAD2或MRGPRX2表达的HEK293细胞内Ca2+离子浓度的增加，这表明ISL并不影响HEK293细胞内LAD2的激活和MRGPRX2表达 (图1 E和F) 。此外， ISL处理没有诱导LAD2细胞体外脱粒，以及对LAD2细胞β-己糖胺酶和HA的释放没有可检测到的影响(图1 g和H) ，表明ISL对LAD2细胞的脱粒可能表现出抑制作用。

图1所示。 ISL是一种潜在的MRGPRX2拮抗剂。 (实验至少重复三次。数据以平均mean ± S.E.M.表示，并分析了两个配对的未配对t检验。 (A-B)通过分子对接实验观察到ISL与MRGPRX2蛋白受体结合。 ISL的3个羟基与PHE147、CYS155、ASP159形成3个氢键，键长分别为1.95 A、2.22 A、1.93 A 。 (C) ISL对LAD2细胞无细胞毒作用。 (D) ISL未诱导LAD2凋亡。 (E F) 50微摩尔ISL不能激活LAD2细胞或表达HEK-293的mrgprx2细胞，增加细胞内钙离子(Ca2+)浓度。 (G-H) ISL未能诱导LAD2细胞脱粒和β-hexosaminidase和组胺的释放。 C48/80(30μg /毫升)作为积极的控制和Tyrode年代的解决方案是使用空白的控制。